В Resident Evil 5: Gold Edition представлена возможность играть по сети на пиратке бесплатно с другом, проходя вместе сюжетную кампанию по интернету онлайн. Можно играть в одиночку. В таком случае роль напарника берет на себя искусственный интеллект. Возможность бесплатной сетевой игры позволяет совместно пройти дополнения Lost In Nightmares и Desperate Escape, входящие в состав Gold Edition.

События переносятся в Африку. Протагонисты охотятся за Альбертом Вескером и пытаются узнать правду о смертельном вирусе Уроборос, который превращает людей в жутких монстров. Сюжет состоит из 6 глав, которые разделены на несколько эпизодов. Перед началом главы можно выбрать оружие и снаряжение, а также купить или продать ненужные пушки и предметы. Инвентарь состоит из 9 ячеек. Он доступен в режиме реального времени. Представлено множество QTE-механик. Во многих катсценах и геймплейных моментах сетевая игра разделяет обязанности между героями. Ошибка одного из участников приводит к геймоверу.

Протагонисты Resident Evil 5:

• Крис Редфилд - бывший член ST.RS, а ныне один из основателей BSAA;
  
• Шева Аломар - напарница Криса на протяжении всего прохождения;
  
• Джилл Валентайн - одна из героинь предыдущих частей, считающаяся погибшей;
  
• Джош Стоун - командир отряда Дельта и наставник Шевы.
  

Боссами выступают Рикардо Ирвин, Экселла Джионне, Альберт Вескер и разнообразные монстры. Огромный акцент игровой процесс делает на экшн, отводя квестовую часть на второй план. В большинстве случаев головоломки сводятся к поиску ключей. Помимо сюжетной кампании доступен режим Наемники. В нем можно сыграть на 8 картах из основного приключения 10 персонажами. Некоторые из героев и их вооружение открывается по мере повышения уровня.